种子检验机构如何根据检验任务选择适宜的检验方法并开展检验工作

室内检验方法:主要是播种品质的检验，包括：种子纯度、净度、发芽力、生活力、活力、种子水分、种子重量和种子健康度等内容。

1、扦样

室内检验取样借助于一种专用的扦样器进行扦样，扦样是种子检验的第一步，由于种子检验是破坏性检验，不可能将整批种子全部进行检验，只能从种子批中随机抽取一小部分相当数量的有代表性的供检验用的样品。扦样是否正确，样品是否有代表性，直接影响到种子检验结果的正确性。

（1）样品的组成

扦取后的样品按其组成不同，可分为初次样品、混合样品、送验样品和试验样品。

（2）扦样方法

①样品必须由检验人员亲自扦取，扦取前必须调查了解种子批的基本情况，查看相关文件记录，实地观察种子批的贮藏环境和包装状况。

②根据被扦种子数量进行种子批划分，再根据种子批的堆放方式和种子的种类决定扦样的部位和扦样的点数。样点在种子批中的分布要随机均匀。

A袋装种子扦样法：扦样的袋数(扦样点数)取决于总袋数。在调种数量多，时间紧迫时，可酌情减少扦样袋数，但不能少于总袋数的5%。

种子袋堆垛时，各扦样点应均匀地分布在上、中、下各层，种子袋不是堆垛而是平放时，可间隔一定袋数确定各取样袋。

扦样时，中小粒种子用单管扦样器，从袋口的一角斜插向袋的对角。大粒种子可采用相适应的扦样器或倒包，徒手扦样等方法扦样。徒手扦样时应注意每次用手取种子的数量，以保证各个初次样品的量大致相等。

B散装种子扦样法：随即从种子的不同部位和深度扦取初次样品，样点既要有水平分布又要有垂直分布的原则，将样点均匀地设在种子堆的不同部位，点数根据种子批的大小来确定。

扦样时，先扦上层，次扦中层，后扦下层，避免先扦下层时使上层种子混入下层，影响扦样的正确性。

适于袋装种子扦样的器械有单管扦样器、羊角扦样器和双管扦样器。适于散装种子扦样的是长柄短筒圆锥形扦样器、圆筒形扦样器和圆锥形扦样器。

（3）样品的配制

①混合样品的配制 在各点扦取若干初次样品时，注意观察每次扦取的初次样品在纯度、净度、颜色、气味和水分等方面有无明显差异，如无差异就可将一个检验单位的全部初次样品均匀混合在一起，便组成了混合样品，如发现初次样品间的品质有差异，则应作为不同的检验单位处理，即分别将有差异的若干初次样品组成不同的混合样品。

②送验样品的配制 各种作物送验样品的规定量不同，并且往往小于混合样品，这就要求从混合样品中分出缩小的样品来。从混合样品中分出一定数量送检验室供各项检验分析用的种子，即送验样品。当混合样品较少而与规定的送检样品数量相符时，就可把此样品作为送验样品。

分取送验样品有机械分样和徒手分样两类，机械分样是使用分样器分样，包括钟鼎式分样器、横格式分样器和电动分样器。徒手分样采用四分法，是利用对分递减的方法进行分样。无论采用哪种分样方法，目的是既分样均匀有代表性，又达到规定的数量。

③送验样品的处理 每个混合样品分取两份送验样品，一份供检验净度(包括纯度、发芽力、生活力、活力、千粒重等)用，可装入布装或纸袋内；另一份供水分、病虫害测定和保留样品用，其重量可比净度检验少一半，该份样品应密封包装，并置于防湿的容器内。容器应贴好标签。送验样品连同扦样证明书应由扦样员尽快送到种子检验室进行验收保存[2]。

同时，要特别注意包衣种子的扦样。

2、种子净度分析

种子净度(seed cleanliness)是指种子清洁干净的程度，即样品中除去杂质和其它植物种子后，留下的本作物(种)净种子重量占种子样品总重量的百分率。

种子的净度是种子播种品质的重要指标之一，是种子分级的依据。净度分析的目的首先是要了解一批种子的真实重量，为计算种子用价(种子用价=净度×发芽率)提供一项指标。其次是了解一批种子中其它植物种子及无生命杂质的种类和含量，以便采取适当的清理方法，提高种子批的播种品质。

净度分析的方法主要有精确法和快速法。其中，快速法技术简单，主观影响小，分析省时，分析结果误差小，对净种子的区分界限明显，标准易掌握，而能广泛应用；精确法的结果更符合实际。

3、品种纯度检验

品种纯度检验对保证原种和良种的质量也是很重要的。因为在原种的繁殖过程中，虽然逐株进行了鉴定，保证了原种植株是高纯度的，但隔离条件收获、脱粒、贮藏等方面，都不易得到绝对的保证。良种虽然直接用于商品生产，不影响下一代，但如果在良种采收或采收后的一系列过程中，发生了生物学和机械混杂而未及时检验出来，同样将会给生产造成不可估量的损失。

（1）形态鉴定

包括籽粒形态测定、种苗形态测定和植株形态测定。

籽粒形态测定虽然简单快速，但仅适合籽粒较大、形态性状丰富的作物，测定结果受主观影响较大。种苗形态测定适于幼苗形态性状丰富的作物，因苗期所依据的性状有限，所以测定结果不太准确。植株形态测定依据的性状较多，测定结果较准确，但植株形态测定需要时间较长，难以满足在调种过程中快速测定的需要[1]。

（2）物理化学法鉴定

化学鉴定：主要依据化学反应所产生的颜色的差异区分不同品种。有苯酚染色法、碘化钾染色法等。

物理鉴定：区别种类的种类较少，难以满足品种纯度准确测定的要求。包括荧光鉴定法、煮沸法等。

（3）生理生化法鉴定

利用生理生化反应和生理生化技术进行品种纯度测定，以生理生化反应为基础的有愈伤木酚染色法、光周期反应鉴定法、除草剂敏感性鉴定法等。这些方法鉴别品种的能力较低，因此结果不太准确。以生理生化技术为基础的方法有电泳法鉴定、色谱法鉴定、免疫技术鉴定等。色谱法技术含量较高，免疫技术需要大量技术开发研究，目前两者都难以在生产实际应用中广泛应用。电泳法相对较为简单，依据蛋白质或同工酶电泳，可以相对准确的测定品种纯度，是目前品种纯度测定中较为快速准确的方法。

（4）分子生物学方法鉴定

种类非常多，是在DNA和RNA等分子水平上鉴别不同品种。常用的有RAPD技术、SSR技术、AFLP技术、RFLP技术。因其技术复杂，成本高，目前难以广泛应用。

4、种子发芽力检验

种子发芽力是指种子在适宜条件下发芽并长成正常植株的能力，通常用发芽势(germinating enery)和发芽率(germinating percentage)表示。种子发芽势高，表示种子活力强，发芽整齐，田间出苗一致。种子发芽率高，表示有活力的种子多，播种后出苗率可能高。

发芽试验通常是在实验室条件下进行的。因为在田间条件下试验受环境影响大，其试验结果重演性差。而在实验室可控制适宜的标准化条件，使试验结果准确可靠。

5、种子生活力检验

种子生活力是指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。一般情况下，种子生活力可以通过发芽力表示。但是由于低温潮湿条件下收获的某些作物(如黄瓜、甜瓜等)往往未达生理成熟，还处于生理休眠状态，某些作物种子的种被或稃壳不透气(如禾本科)和种皮不透水(如小粒豆科种子、棉子等)，使得在一般发芽条件下具有生命力的种子也不能及时发芽。因此通过一定的技术手段来测定种子的生活力，具有实践意义。

种子生活力测定的方法较多，根据其测定原理可大致分为4类：

⑴生物化学方法。主要有四唑染色法、溴麝香草酚蓝法、甲稀兰法、中性红法、二硝基苯法等。

⑵组织化学法。主要有靛蓝染色法、红墨水染色法和软X-射线造影法等。

⑶荧光分析法

⑷离体胚测定法。

其中四唑染色法、离体胚测定法、染料染色法和软X射线造影法应用较多。

6、种子活力检验

种子活力的概念是指种子批在发芽和出苗期间，其内在活性和表现性能潜在水平的所有特性总和。

种子活力是种子质量的一个综合指标，由于各种类型种子其单粒重、种皮厚度、发芽速度差异较大，因此，测定方法也有所不同。目前，国内外主要有以下几种：外部形态法（目测法）、逆境试验法、荧光法、.软X-射线造影法、乙烯含量法、电导法、呼吸强度法、ATP含量法、四唑测定法。

7、种子水分测定

种子水分(seed moisture content)又称种子含水量，是指种子样品中所含水分的重量占样品重量的百分率。种子含水量与种子有效贮藏年限有直接的关系，超过安全含水量的种子在贮藏期间，会因呼吸旺盛消耗养分，造成发芽，同时因为发热使微生物大量繁殖，导致种子霉变等。因此必须将种子含水量控制在安全范围内。

种子水分的测定方法很多，目前常用烘干减重法和电子仪器测定法。

8、种子健康测定

种子健康测定(seed health testing)的目的是了解种子样品的健康状况，并由此推知种子批的健康状况，从而比较不同批的价值和有目的地控制危害性病虫害的蔓延。

目前测定种子健康程度的主要方法有：肉眼检验、过筛检验、剖粒检验 、染色检验、比重检验、洗涤检验、滤纸培养检验、琼脂培养检验、荧光反应检验、漏斗分离检验 。

田间药效试验的调查内容与方法是什么？

a、进行种群密度调查时，若调查一个种群的种群密度，则只能选取一种植物进行调查；若要调查几个种群的种群密度时，则可以选取多种植物进行调查，a错误；

b、在调查时应随机选取大小相等的若干个样方（一般采用五点取样法或等距取样法），b错误；

c、计算各样方内的数值，求和后再计算平均值，c错误；

d、样方内各年龄段的植物均需统计，否则会产生误差，d正确．

故选：d．

做好药效试验记录是重要的。在安排药效试验前，下面的基本记录是不可缺少的：农药试验批准证号（针对政府安排的登记试验），农药生产单位，农药种类，农药名称（包括中文通用名称和英文通用名称），有效成分含量，剂型以及试验范围与使用方法（包括作物品种，防治对象，用药量，具体施用方法）。必需的调查内容包括试验进行期间的气象资料（降水类型，日降水量，温度），土壤资料（土壤类型，肥力状况及杂草覆盖情况等，水田施药还要记录水层深度）和药效。基本的药效调查与计算方法如下：

1．杀虫剂

通常采取随机抽样法对杀虫剂药效进行调查。由于害虫在田间的分布方式不同，或呈随机型，或呈核心型与嵌纹型或三个基本型的混合型，就要求调查应采取不同的方法。如对角线法、大五点法、棋盘式法、平行线法、分行法和Z字形法等。调查统计的内容也随昆虫种类、不同虫态活动栖息的方式和作物类别而灵活运用。常用的统计单位有面积、长度、容积、植株数量或植株的一部分、重量和时间等。调查有时需要借用特殊的器械如放大镜、计数器、捕虫网和衡器等。设计不同的调查方法和统计单位，都是为了统一标准，便于比较，以求从中获得准确信息。

杀虫剂药效一般采用校正死亡率（直接计数施药前后的虫口数量并由空白对照的自然虫口消长率进行校正）与作物被害程度来表示。如：

①杀虫剂对棉铃虫幼虫的防治效果计算方法：

式中：PT为药剂处理区虫口减退率；CK为空白对照区虫口减退（或增长）率。

在调查施药后不同期间的虫口减退率时，要考虑到田间植株上的落卵量及卵孵化率，故在各个调查时段的真正虫口减退率应为：

②杀虫剂对水稻二化螟的防治效果计算方法：

式中：CK为空白对照区药后枯心（白穗）率；PT为药剂处理区药后枯心（白穗）率。

计算杀虫剂药效的其他统计方法还有很多，多是在以上两种基本方法上演化出来的。

2．杀菌剂

计算杀菌剂药效的方法一般采用作物被害率法。常将施药区和空白对照区的被调查作物按病害程度进行分级，然后根据病情指数计算防治效果。如：

①杀菌剂防治禾谷类白粉病效果计算方法（代表叶部病害）：

在每个小区以对角线法固定5点取样，每点调查0.25m2小麦植株，小麦起身拔节期调查基部1～5片叶，抽穗后调查旗叶及旗叶下第一片叶。

白粉病的分级方法（以叶片为单位）：

0级：无病；

1级：病斑面积占整个叶片面积的5%以下；

3级：病斑面积占整个叶片面积的6%～15%；

5级：病斑面积占整个叶片面积的16%～25%；

7级：病斑面积占整个叶片面积的26%～50%；

9级：病斑面积占整个叶片面积的50%以上。

药效按（1）、（2）式计算：

式中：CK0为空白对照区施药前病情指数；CK1为空白对照区施药后病情指数；PT0为药剂处理区施药前病情指数；PT1为药剂处理区施药后病情指数。

若施药前未调查病情指数，则防治效果按（3）式计算：

②杀菌剂防治禾谷类种传病害效果计算方法：

对一些植物的种传病害，由于对病害程度进行分级比较困难，其防治效果计算常采取比较简单的方法：

式中：CK为空白对照区病株率；PT为药剂处理区病株率。

计算杀菌剂药效的其他统计方法还有很多，多是在以上几种基本方法上演化出来的。

3．除草

对除草剂药效的表达常采用受害症状、杂草种类、杂草覆盖度或杂草重量等表示。用绝对值法或估计值法进行统计。

在施用除草剂后，要详细调查并记录杂草的受害症状，如生长受到抑制、失绿、畸形、枯斑等，以准确说明药剂的作用方式。

绝对值调查法也称数测调查法，是调查计算单位面积上的每种杂草总株数或重量，对整个小区进行调查或在每个小区随机选取3～4个样方，每个样方0.25～1m2进行抽样调查。特殊情况下，调查特殊杂草的器官（例如禾草分蘖数）等。

估计值调查法也称目测调查法，为每个药剂处理区同临近的空白对照区或对照带进行比较，估计相对杂草种群量。这种调查方法包括杂草群落总体和单种杂草，可用杂草数量、覆盖度、高度和长势（例如实际的杂草量）等指标来表示。这种方法简单、快速，其结果可以用简单的百分比表示（0为无草，100%为处理区与空白对照区杂草同等）。为了克服估计带来的误差，可以采取分级标准进行调查：

1级：无草；

2级：相当于空白对照区的0～2.5%；

3级：相当于空白对照区的2.6%～5%；

4级：相当于空白对照区的5.1%～10%；

5级：相当于空白对照区的10.1%～15%；

6级：相当于空白对照区的15.1%～25%；

7级：相当于空白对照区的25.1%～35%；

8级：相当于空白对照区的35.1%～67.5%；

9级：相当于空白对照区的67.6%～100%。

在做好以上调查的基础上，防治效果计算则相对较简单：

式中：CK为空白对照区存活杂草数（或鲜重）；PT为药剂处理区存活杂草数（或鲜重）。

无论是杀虫剂、杀菌剂还是除草剂等农药田间试验，都要调查药剂处理后对作物的药害情况，有特殊要求的，还应调查对天敌的伤亡情况等。